ಸದಸ್ಯ:Mounica m/sandbox

ವಿಕಿಪೀಡಿಯದಿಂದ, ಇದು ಮುಕ್ತ ಹಾಗೂ ಸ್ವತಂತ್ರ ವಿಶ್ವಕೋಶ

pUC8 ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್

ಇದು ಒಂದು ಅಬಿಜ ವೆಕ್ತರ್ ಒದು ವಿಧ.ಪಿಉ ಸಿ ೮ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಮಾತ್ರ ಪ್ರತಿಕ್ರಿತಿ ಮುಲ ಮತ್ತು AMPR ಜೆನ್ ಉಳಿದ pBR322 ಉಳಿಯಲಾಗಿದೆ.ಎಲ್ಲ ಅಬೀಜ ಸಯ್ಟುಗಳು pUC8 ಹೊತೊಯುದು ಲ್ಯಾಕ್ Z' ಜೀನ್ ಒಂದು ಸಣ್ಣ ವಿಭಾಗದಲ್ಲಿ ಗೊಂಚಲುಗೊಂಚಲಾಗಿದೆ.ಬಿರುದು "ಪಿಯುಸಿ" ಶಾಸ್ತ್ರೀಯ "ಪುಟ" ಪೂರ್ವಶಾಸ್ತ್ರಿಯ ಮತ್ತು ಆರಂಭಿಕ ನಡೆಸಲಾಗಿತ್ತು ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ಸರಣಿ ಅಲ್ಲಿ ಕ್ಯಾಲಿಫೋರ್ನಿಯಾ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯ, ಸಂಕಿ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ. pBR322 ರಿಂದ,amphicillin ಪ್ರತಿರೊದಕ ವಂಶವಾಹಿ ಉಳಿಸಿಗೊಂಡಿತು ಮತ್ತು tetracyclin ತೆಗೆದು ಇ ಕೊಲಿ ಜಿನೊಮ್ ಪಡೆದುಕೊಂಡರು ಲ್ಯಾಕ್ ಸೆರಿಸಲಾಯಿತು.ಅವರು ಸೈಟ್ ಪರಿವರ್ತನೆ ನಿರ್ದೆಶನದ ಮತ್ತು ಅನೇಕ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಜಾಗಗಳು ಒಳಗೊಂಡಿವೆ.LAC Z' Hind3,Pst1,Sal1,Bamh1,Sma1 ಮತ್ತು EcoR1ಅನೆಕ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಜಾಲತಾಣಗಳಿಗೆ ಒಂದು polylinker ಆಗಿದೆ.

ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್
ಪರಿವಿಡಿ
1. ಪ್ರಯೊಜನಗಲು
2. ಅಬೀಜ ವಿದಾನಗಳು

pUC8 ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಜೊತೆ ಪ್ರಯೊಜನಗಲು

pUC8 ನಿರ್ಮನದಲ್ಲಿ ಭಾಗಿಯಾದ ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಸಹ ವರ್ಧನೆ ಮೊದಲು ಪ್ರತಿಯನ್ನು ಸಂಖ್ಯೆ 500-700 ಹೊಂದಿರುವ, ಪ್ರತಿಕ್ರತಿ ಮುಲ ಒಳಗೆ, ಅವಕಾಶ ಪರಿವರ್ತನೆ ಜೊತೆಯಲ್ಲಿದ್ದರು. ಈ ಮರುಮಿಶ್ರಿತ pUC8 ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ಗಳು ರೂಪಾನ್ತರಗೊಳುತ್ತದೆ. ಕೊಲಿ ಜೀವಕೊಶಗಳಿಂದ ಪಡೆಯಬಹುದಾದ ಅಬೀಜ ಡಿಎನ್ ಎ ಇಳುವರಿಯ ಮೇಲೆ ಗಮನಾರ್ಹವಾದ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಬೀರುತ್ತದೆ. pUC ವಾಹಕಗಳು ನಿರ್ಬನ್ಧದ ಸೈಟ್ಗಳು ವಿವಿಧ ಸನ್ಯೋಜನೆಯನ್ನು ಸಾಗಿಸುವ ಮತ್ತು ಅಭೀಜ ಎನ್ದು DNA ತುಣುಕಿನ ರೀತಿಯ ಹೆಚ್ಚಿನ ನಮ್ಯತೆಯನ್ನು ತೋರಿಸಲು. ನಿರ್ಬನ್ಧದ ಸೈಟ್ಘಾಳೂ ಕ್ಲಸ್ಟರಿಂಗ್ ಎರಡು ವಿಭಿನ್ನ ಜಿಗುಟಾದ ಕೊನೆಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ DNA ತುಣುಕಿನ ಲೀಂಕರ್ ಬಾನ್ಧವ್ಯ ಒಳಗೊಂಡ ಇಲ್ಲದೆ ಅಬೀಜ ಅನುಮತಿಸುತ್ತದೆ. ಪಿಯುಸಿ ಸರಣಿಯ ಸದಸ್ಯ ಆಗಿ ಅಬಿಜ ಡೀ ಎನ್ ಎ ಎಕೆಂದರೆ ಅದೆ ನಿರ್ಬನ್ಧದ ಸೈಟ್ ಸನೂಹಗಲ, ಅದರ M13mp ಕೌಣ್ಟಾಅರ್ ನೇರವಾಗಿ ​​ವರ್ಗಾಯಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಇದು ಡಿ ಎನ್ ಎ ಅನುಕ್ರಮ ಮೂಲಕ ಅಥವಾ ಫ್ರಾಣಾಳೀಯ ವಿಕ್ರಿತಿ ಇವುಗಲಣ್ನು ವಿಶ್ಲೇಶೀಸಬಹುದು.PUC8 ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಜೊತೆ ಮರುಮಿಶ್ರಿತ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಗುರುತಿನ, ಎಕ್ಸ್-ಗ್ಯಾಲ್ ಜೊತೆ ampicillin ಹೊನ್ದಿರುವ ಅಗರ್ ಮಧ್ಯಮ ಮೇಲೆ ಲೋಹಲೇಪ ಒನ್ದು ಹೆಜ್ಜೆ ಸಾಧಿಸಬಹುದು. PBR322 ಮತ್ತು pBR327 ಎರಡು ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ಗಳು, ರೆಚೊಮ್ಬಿನನ್ತ್ಸ್ ಆಯ್ಕೆ ಮತ್ತೊನ್ದು ಪ್ರತಿಜೀವಕ ಮಾಧ್ಯಮದಿನ್ದ ಪ್ರತಿಕೃತಿ - ಲೋಹಲೇಪ ಅಗತ್ಯ, ಎರಡು ಹನ್ತದ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಏಕೆಂದರೆ pUC8 ಒಂದು ಅಬೀಜ ಪ್ರಯೊಗ pBR322 ಮತ್ತು pBR327 ಜೊತೆ ಅಗತ್ಯವಿದೆ ಅರ್ಧ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ನಡೆಸಬಹುದು.

PUC8 ಅಬೀಜ ವಿದಾನಗಳು

pUC8 ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಕಿನ್ವಾಡ ಭಾಗ ampicillin ಪ್ರತಿರೋಧಕ ವನ್ಶವಾಹಿ ಮತ್ತು ಜೀನ್ ಎಂಬ LAC Z',ಇದು ಸಂಕೇತಗಳು ಒಯ್ಯುತ್ತದೆ ಬಿ ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಬೇಸ್.PUC8 ಅಬೀಜ ಸನ್ತಾನೋಪತ್ತಿ LAC Z' ಜೀನ್ ಸೇರ್ಪಡೆಯಿನ್ದ ನಿಶ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆ ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ರೆಚೊಮ್ಬಿನನ್ತ್ಸ್ ಅವರು ಸುಲಭವಾಗಿ ಇದೆನ್ತಿಫ಼ಿಎದ್ ಮಾಡಬಹುದಾದ ಫಾರ್ ಬಿ ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೊಸಿಬೇಸ್ ಸಂಶ್ಲೇಶಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುವುದಿಲ್ಲ . B ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಬೇಸ್ ಗ್ಲೂಕೋಸ್ ಮತ್ತು ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೊಸ್ ಆಗಿ ಲ್ಯಾಕ್ಟೊಸ್ ಸ್ಥಗಿತ ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಕಿನ್ವ. ಇದು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಇ ಕೊಲಿ ವರ್ಣತನ್ತುವಿನ ಮೇಲಿನ ಇರುವ ಜೀನ್ LAC Z, ಮಾಡಲಾದ ಇದೆ. .ಕೊಲಿ ಕೆಲವು ತಳಿಗಳು ಬದಲಾಯಿಸಲಾಗಿತ್ತು LAC Z ವನ್ಸವಾಹಿ, ವಿಭಾಗದಲ್ಲಿ ಲ್ಯಾಕ್ Z ಎಂದು ಮತ್ತು ಬಿ ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೊಸಿಬೇಸ್ ಎ - ಪ ಭಾಗವನ್ನು ಕೋಡೀಂಗ್ ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಲಚ್ಸ್ ಒಂದು ಹೊನ್ದಿವೆ. ಜೀನ್ ಕಾಣೆಯಾಗಿದೆ LAC Z'ವಿಭಾಗದಲ್ಲಿ ವಾಹಕವಾದ ಇಂತಹ pUC8 ಎಂದು ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್, ಹಿಡಿದಿದ್ದರೆ ಈ ಮ್ಯಾಟೆಂಟ್ಸ್ ಮಾತ್ರ ಕಿನ್ವ ಸಂಶ್ಲೇಶಿತಗೊಳಿಸಬಹುದು .LAC Z' ಜೀನ್ ವಂಶವಾಹಿಯ ಕೋಡಿಂಗ್ ವಲಯದ ಮೊದಲಭಾಗ ಬಹು ನಿರ್ಬನ್ಧದ ಕಿನ್ವಾ ತಾಣಗಳನ್ನು. ಈ ಪ್ರದೇಸಹದಲ್ಲಿ ಅನೇಕ ಅಬೀಜ ಸೈತ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ; ಈ ತಾನಗಲ ಅಥವಾಯಾವುದೆ ಜೋಡಿ ನಡುವೆಯಾವುದೇ ಗುರಿ ಡಿ ಎನ್ ಎ ಅಲವಡಿಕೆ , ಸೂಕ್ತ ಪ್ಲೇಟ್ ಮೇಲೆ ಬಿಳೀ ವಸಾಹತು ನೀದಾಲು,LAC Z' ಜೀನ್ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸದಂತೆ. ಒಂದು ಎನ್ಸಿಗಳು ಬಳಕೆ ಅಬೀಜ ನಿರ್ಭನ್ಧ ಕಿನ್ವ ಅಥವಾ ಕಿನ್ವಗಳು ನಮ್ಯತೆಯನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ.PUC8 ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಜೊತೆ ಒಂದು ಅಬೀಜ ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ, ತ್ರನ್ಸ್ಫ಼ೊರ್ಮನ್ತ್ಸ್ ampicillin agar ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಆತ್ಕೆ. ರೆಚೊಮ್ಬಿನನ್ತ್ಸ್ ಬಿ ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಬೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಗೆ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ಗುರುತಿಸುತ್ತಾನೆ .ಸಾಮಾನ್ಯ pUC8 ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ನಡೆಸುವ ಜಿವಕೋಸಾಗಳು AMPR ಮತ್ತು ಬಿ ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಬೇಸ್ ಉತ್ಪತ್ತಿ ಮಾಡಿಕೊಳ್ಳುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ; ರೆಚೊಮ್ಬಿನನ್ತ್ಸ್ ಇವೆ ಆದರೆ ಸಹ AMPR ಆದರೆ ಬಿ ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಬೇಸ್ ಉಪಸ್ಥಿತಿ ಅತವಾ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಬಿ-ಗಲಚ್ತೊಸಿದಸೆ . ಸ್ಚ್ರೀನಿನ್ಗ್ ಒಂದು ಲ್ಯಾಕ್ಟೊಸ ಅನಾಲಾಗ್ ಎಂಬ ಎಕ್ಸ್-ಗ್ಯಾಲ್ ಒಳಗೊಂಡ ಮಾಡಲಗುತ್ತದೆ ಮಾಡಳು ಸಾಧ್ಯವಾಗುವುದಿಲ್ಲ (5-ಬ್ರೋಮೋ- 4-ಕ್ಲೋರೋ- 3 -ಇನ್ದೊಲ್ಯ್ಲ್ - ಬಿ - ಡಿ ಗಲಚ್ತೊಪ್ಯ್ರನೊಸಿದೆ ) ಇದು ಆಳಾವಾದ ನೀಳಿ ಬಣ್ಣದ ಒಂದು ಉತ್ಪನ್ನಕ್ಕೆ ಬಿ ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಬೇಸ್ ಮೂಲಕ ಮುರಿದು. ಎಕ್ಸ್-ಗ್ಯಾಲ್ ಕಿನ್ವಾ ಐಸೊಪ್ರೊಪೈಲ್- ಥಿಒಗಲಚ್ತೊಸಿದೆ (ಐಪಿಟಿಝಿ) ಪ್ರೇರಕವಾಗುತ್ತದೆ ಜೊತೆ, Ampicillin ಜೊತೆ ಜೊತೆಗೆ , ಅಗರ್ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ವೇಳೆ, ನಂತರ ಅಲ್ಲದ ಮರುಮಿಶ್ರಿತ ವಸಾಹತುಗಳು ಬಿ ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಬೇಸ್ ಸಂಶ್ಲೆಶಿಸಲು ಇದುಜೀವಕೊಷಗಳು, ನೀಲಿ ಬಣ್ಣದ ರೆಚೊಮ್ಬಿನನ್ನ್ತ್ಸ್ಆದರೆ ನಡೆಯಲಿದೆ ಒಂದು ಅಡ್ಡಿಯನ್ನುಂಟು ಲ್ಯಾಕ್ Z ವನ್ಸವಾಹಿ ಹಾಗೂ ಬಿ ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಬೇಸ್ ಮಾಡಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುವುದಿಲ್ಲ, ಬಿಳಿ ಜೊತೆ.

ಉಲ್ಲೆಖಗಳು [೧] [೨]

  1. http://www.discoverbiotech.com/wiki/-/wiki/Main/Cloning+Vectors
  2. ಪುಸ್ತಕ : ಜೀನ್ಸ್ ಟು ಕ್ಲೊನ್ಸ್